Как установили исследователи, Космо имел пару хромосом XY, то есть был бы самцом даже без редактирования его генома, ибо унаследовал ген SRY от своего биологического отца. Однако благодаря вставке, произведённой Оуэном, этот ген оказался и в его 17-й хромосоме, а значит, эксперимент удался: впервые в мире технология CRISPR успешно сработала в эмбрионе крупного рогатого скота. «Это реально круто — получить такой результат, — убеждена ван Эненнам. — Этот день войдёт в историю науки как один из лучших».
Но это не всё, что удалось выяснить уже при первом, быстром сканировании ДНК Космо. Ещё был обнаружен фрагмент генетического кода не коровы или медузы, а бактерии. Чтобы вставить большой ген — а длина гена SRY составляет несколько тысяч букв ДНК — в одноклеточный эмбрион Космо, Оуэну пришлось доставить его в клетку единственным возможным в то время способом: поместив его в плазмиду — круглый фрагмент бактериальной ДНК. После того, как технология CRISPR сделала свои разрезы, ферменты репарации ДНК Космо захватили плазмиду вместе с геном SRY и вставили всё это в геном.
...Технология CRISPR сделала вставки, которые и должна была сделать. Но не только это. В результате на том участке, где ван Эненнам и Оуэн планировали вставить лишь пару генов (гены SRY и GFP), картина оказалась гораздо более сложной и запутанной. На одном плече 17-й хромосомы запланированное изменение структуры ДНК вообще не получилось. Клетка ликвидировала разрыв с помощью случайно образовавшейся последовательности из 26 «букв» ДНК. (Устранять разрывы двухцепочечной ДНК таким путём вполне нормально для клетки). Существенную роль сыграли изменения, которым подверглось другое плечо. Примерно в 90 процентах клеток было выявлено семь копий генов SRY и GFP. Две из них оказались вставленными задом наперёд. А ещё там присутствовала бактериальная плазмида. Примерно в 10 процентах клеток учёные обнаружили три (должным образом ориентированных) копии конструкции SRY-GFP и одну плазмиду.
Важно не то, куда попали копии гена SRY, а то, что их оказалось много. Вдобавок, в Y-хромосоме обнаружили копию этого гена, унаследованную Космо от его отца. «Он очень мужественный мужчина», — шутит ван Эненнам. Эти множественные вставки не планировались, отмечает она, но пока они, по-видимому, не причиняют Космо никакого вреда. «Факт его существования свидетельствует о том, что наличие в его организме большего, чем необходимо, количества копий гена SRY, не является смертельным», — говорит ван Эненнам.
alev.biz/news/science-news/biotechnology/kak-ro...
Но это не всё, что удалось выяснить уже при первом, быстром сканировании ДНК Космо. Ещё был обнаружен фрагмент генетического кода не коровы или медузы, а бактерии. Чтобы вставить большой ген — а длина гена SRY составляет несколько тысяч букв ДНК — в одноклеточный эмбрион Космо, Оуэну пришлось доставить его в клетку единственным возможным в то время способом: поместив его в плазмиду — круглый фрагмент бактериальной ДНК. После того, как технология CRISPR сделала свои разрезы, ферменты репарации ДНК Космо захватили плазмиду вместе с геном SRY и вставили всё это в геном.
...Технология CRISPR сделала вставки, которые и должна была сделать. Но не только это. В результате на том участке, где ван Эненнам и Оуэн планировали вставить лишь пару генов (гены SRY и GFP), картина оказалась гораздо более сложной и запутанной. На одном плече 17-й хромосомы запланированное изменение структуры ДНК вообще не получилось. Клетка ликвидировала разрыв с помощью случайно образовавшейся последовательности из 26 «букв» ДНК. (Устранять разрывы двухцепочечной ДНК таким путём вполне нормально для клетки). Существенную роль сыграли изменения, которым подверглось другое плечо. Примерно в 90 процентах клеток было выявлено семь копий генов SRY и GFP. Две из них оказались вставленными задом наперёд. А ещё там присутствовала бактериальная плазмида. Примерно в 10 процентах клеток учёные обнаружили три (должным образом ориентированных) копии конструкции SRY-GFP и одну плазмиду.
Важно не то, куда попали копии гена SRY, а то, что их оказалось много. Вдобавок, в Y-хромосоме обнаружили копию этого гена, унаследованную Космо от его отца. «Он очень мужественный мужчина», — шутит ван Эненнам. Эти множественные вставки не планировались, отмечает она, но пока они, по-видимому, не причиняют Космо никакого вреда. «Факт его существования свидетельствует о том, что наличие в его организме большего, чем необходимо, количества копий гена SRY, не является смертельным», — говорит ван Эненнам.
alev.biz/news/science-news/biotechnology/kak-ro...